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专家解释:输入性HIV抗体如何检测(一)

上传时间:2020-08-22 19:57:13文章来源:广东省疾病预防控制中心

检测HIV抗体是常用的HIV感染的病原学诊断方法,一般情况下,HIV抗体阳性就意味着感染了HIV。但有时,检出的HIV抗体可能是被动输入体内的,HIV抗体阳性可能并未感染HIV。如何识别被动输入的HIV抗体?采用什么检测方法和流程?怎样判断是否导致了HIV感染?2020版《全国艾滋病检测技术规范》增加了“输入性HIV抗体检测及流程”,回答了这些问题。

  被动输入最常见的情况是HIV阳性母亲所生的新生儿,无论是否发生感染,孩子出生后HIV抗体都会呈阳性反应,但不一定是HIV感染。未感染HIV的孩子,从母体获得的HIV抗体将逐渐衰减,有研究显示,抗体的半衰期是23.1±4.2天(95% CI20.2-26.0),平均清除时间是13.3月(范围:10.4-15.6月);另一研究发现,大约在出生后6个月抗体转为阴性。因此,诊断18个月以内新生儿HIV感染不能依靠HIV抗体检测,出生后48小时就应采血进行HIV核酸检测。

  还有一种很罕见的情况是输入HIV抗体阳性的免疫球蛋白。人免疫球蛋白是多价人抗体血液制品,临床上主要用于抗感染、治疗原发性免疫缺陷等。人免疫球蛋白是以健康人血浆为原料制备的,对原料血浆除了要进行HIV抗体和核酸检测,还要设置不少于90天的检疫期,将检测合格的原料血浆放置90天后,对献浆员再次进行HIV检测,合格后方可将90天前采集并检测合格的血浆投入生产。在免疫球蛋白的制备过程中还要采用2种经验证有效的方法去除或灭活病毒。可见,从血浆采集到制备出成品有多重安全保障措施,即使在非常罕见的情况下检出HIV抗体,也不一定存在病毒。

  另外,在艾滋病流行的早期,国外曾试图使用血浆疗法治疗艾滋病,也就是输入HIV抗体阳性的血浆进行被动免疫治疗,这也是被动输入抗体,但这种疗法早已不再使用。

  一旦发现疑似输入HIV抗体,最紧迫问题是确定是否确实输入了HIV抗体?是否发生了HIV感染?怎样随访及随访多长时间?回答这些问题主要依靠检测,需要确定检测什么指标,何时检测,多长时间检测一次,最长随访多长时间。 

  可使用HIV抗原/抗体检测试剂或HIV抗体检测试剂筛查检测以及免疫印迹(WB)或条带免疫印迹试剂HIV抗体确证检测, 还可以检测HIV抗体的滴度,就是把血浆标本用HIV抗体阴性的人血浆进行连续对倍稀释,将稀释的标本进行HIV抗体定性检测,阳性反应的最大稀释度就是抗体滴度。HIV核酸检测一般是检测血浆或制品标本中的HIV-1RNA,也可检测全血标本的HIV-1前病毒DNA,可相应地选择使用血浆标本的HIV-1RNA检测试剂或使用全血标本的HIV-1前病毒DNA检测试剂。

  (10时(基线)检测:也就是在输入抗体的时候进行检测,但一般做不到输入抗体后立即采血检测,因为发现问题时往往已经过去了一段时间。应尽可能在最靠近输入的时间采血检测,最好不超过3天或一周。0时检测非常重要,可以确立随访比较的基线值,为分析输入抗体的消长以

  及是否发生HIV感染提供基础数据。

  24-6周时随访:在输入抗体后4-6周采血检测,通过与基线检测结果的比较,观察输入抗体的动态消长,结合HIV-1核酸检测的结果,判断有无HIV抗体衰减,以及有无可能发生HIV感染。

  33个月时随访:原则上应随访一个最长窗口期,根据HIV抗体和核酸的检测结果及其与基线和4-6周结果的比较,最终判断有无HIV感染。我们都知道,窗口期是从感染病毒到血液中检出病毒标志物的时期,由于不同个体内病毒复制和免疫应答的程度有差别,窗口期的长短有很大的个体差异,选择的检测指标和检测方法也是决定窗口期长短的重要因素,如检测指标在血液中出现早(例如病毒核酸)窗口期就短;如试剂的敏感性高,在病毒标志物应答水平很低时就可检出,窗口期也短。因此,描述窗口期时需要说明检测的是什么指标以及使用的是什么试剂。窗口期在人群水平是一个时间范围,使用相同的试剂,有的人可以很早检出,而有的人却较长时间才能检出。Delaney等用25套系列阳转血浆标本评估了20种美国FDA批准的HIV检测试剂的窗口期,Aptima HIV-1 RNA检测试剂2.5%99%检出的时间分别是5.3天和33天;HIV抗原/抗体检测试剂25%99%的检出时间分别是13天和44天;WB确证试剂25%99%的检出时间分别是31天和65天。随访时间由最长窗口期决定,主要应考虑各项指标的99%检出时间,并结合试剂的敏感性等分析确定。

  美国疾控中心(CDC)和美国健康和人类服务部(U.S Department of Health and Human Services2018年更新的“HIV经性、注射药物或其他非职业暴露的暴露后预防指南”,推荐对高危暴露人员的检测时间是0时(基线)、4-6周和3个月,如果暴露导致了HCV感染,就应随访到6个月。因为HCV的共感染可能导致HIV血清转换延迟。瑞典公共卫生部门和抗病毒治疗参比小组在2016年推荐,高危暴露以后应随访12周(3个月)。由于检测试剂已有了很大的改进,应重新评估窗口期及随访时间,如使用抗原抗体联合检测试剂,可将随访时间缩短到6周。可见,目前推荐的随访时间一般为3个月(12周),如使用最新的敏感性高的检测试剂,在充分评估的基础上,可适当缩短随访时间。

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