正如之前报道的，研究人员在10月份的一次会议上展示了EBT-101在前三名接受治疗的研究参与者中分布良好且未引起严重副作用的发现。尽管那次演讲并未包括关于治疗是否真的能够控制HIV的数据，但这并未阻止《每日邮报》宣称HIV的治愈“可能在几个月之内”实现——这是多年来关于HIV治愈研究状况的众多夸大说法之一。
但现在这些数据已经出来了，消息大体上是不利的。在最初测试的剂量下，EBT-101单独使用时未能维持HIV病毒抑制，尽管它可能在一个参与者中延迟了病毒反弹。此外，其良好的安全性表明，类似的CRISPR方法可能对其他潜在病毒感染（如单纯疱疹和乙型肝炎）是可行的。
“我们知道，许多人对第一次试验能够为HIV的潜在治愈提供证据抱有希望，因为这个领域已经等待了20多年，”Excision BioTherapeutics的高级副总裁威廉·肯尼迪博士在新闻发布会上说。“然而，这项临床试验确立EBT-101作为一种基因疗法产品的安全性，以及与CRISPR使用相关的安全性，对这一领域至关重要。”
抗逆转录病毒疗法可以无限期地抑制HIV复制，但病毒将其遗传蓝图插入人类细胞的DNA中，并建立了一个药物无法触及的长期储存库。这种整合的HIV DNA在治疗期间在静止的T细胞中处于休眠状态，但当停止抗逆转录病毒时，它可以开始产生新的病毒，使得治愈几乎不可能。确定实验性干预是否导致长期缓解的唯一方法是在仔细监测下停止抗逆转录病毒疗法进行分析性治疗中断。
费城坦普尔大学的Kamel Khalili教授及其同事已经研究了十多年的基因疗法，目的是治愈HIV。他们的工作采用了CRISPR/Cas9——有时被称为“分子剪刀”——这是一种结合了导向RNA的技术，这些导向RNA能够定位到DNA的特定片段，以及一个在所需位置切割遗传物质的核酸酶酶。
在2014年和2016年，研究人员报告说，CRISPR/Cas9工具可以从实验室研究中的CD4细胞中切除HIV基因。2019年发表的一项研究表明，这种方法可以去除小鼠体内的整合HIV基因并清除潜在的病毒储存库。在2019年的逆转录病毒和机会性感染会议上，坦普尔大学团队报告说，CRISPR/Cas9疗法成功地从猴子的病毒储存库中去除了类似HIV病毒的片段。
这项研究促成了EBT-101的开发，EBT-101是一种基于CRISPR的疗法，由腺相关病毒载体传递，使用两个导向RNA靶向整合的HIV基因组上的三个位点。在这些位置进行切割可以防止完整新病毒的产生。去年8月，研究人员报告说，单剂量的猿猴版本的疗法在抗逆转录病毒治疗的猴子中安全有效地去除了整合的SIV。但这项研究没有包括治疗中断，因此无法显示这些动物是否功能上被治愈。
EBT-101的第一次人类临床试验（NCT05144386）于2022年开始，在抗逆转录病毒治疗下病毒载量稳定且无法检测到的人群中测试该疗法。Excision宣布，该I/II期试验的第一名参与者在7月份接受了EBT-101，研究方案要求在基因疗法后12周维持病毒抑制的参与者进行分析性治疗中断。
在上周的会议上，圣路易斯华盛顿大学医学院的Rachel Presti博士提供了最新的研究结果。接受初始剂量EBT-101单次输注的五名参与者中，有三名停止了抗逆转录病毒治疗。这三人经历了病毒反弹，不得不重新开始抗逆转录病毒治疗。这很可能是因为基因疗法没有到达所有携带潜在HIV的细胞，即使是极少数含有残留HIV DNA的细胞也足以重新建立病毒复制。
一名EBT-101接受者在治疗中断后能够维持16周的病毒抑制，这比通常在停止抗逆转录病毒后病毒反弹所需的时间要长得多。这表明EBT-101或类似的CRISPR疗法有一天可能在组合治愈策略中发挥作用。
“EBT-101-001试验的初步数据为基因编辑治疗方式可以安全地用于针对人类细胞中的HIV DNA储存库提供了重要的临床证据，”Presti说。“这项研究为研究人员提供了宝贵的见解，关于CRISPR技术如何应用于解决传染病，并是朝着为受到HIV和其他传染病影响的数百万人优化这种治疗方式的重要第一步。”
Excision目前正在测试EBT-101的更高剂量，并探索可能比腺相关病毒载体更有效的新CRISPR传递方法。一种可能性是脂质纳米颗粒，类似于用于传递COVID-19疫苗中信使RNA的那种。
“病毒反弹很可能是由于基因疗法没有到达所有携带潜在HIV的细胞”
该公司还在探索基于CRISPR的方法来治疗其他潜在感染。在上周会议上的其他演讲中，研究人员报告了针对单纯疱疹（EBT-104）和乙型肝炎（EBT-107）的实验性疗法的有希望的临床前结果。单纯疱疹病毒（HSV）在神经细胞中持续存在，它可以重新激活以引起冷疮、生殖器疱疹和角膜炎（眼炎）。乙型肝炎病毒（HBV）在肝脏中建立慢性感染，可能导致肝硬化和肝癌。然而，与HIV和其他逆转录病毒不同，HSV和HBV不会将它们的遗传蓝图整合到宿主细胞的染色体中，因此它们可能更容易被移除。
从少数自然控制HIV的人、更大的治疗后控制者群体以及少数在干细胞移植后被治愈的人那里学到了许多教训。但就目前而言，一个广泛适用的功能性治愈仍然是一个长期前景。
参考来源：
Presti R. First-in-human clinical trial of systemic CRISPR-CA9 multiplex targeting of latent HIV. American Society of Gene & Cell Therapy, Baltimore, 2024.
Excision BioTherapeutics. Excision BioTherapeutics announces data from the phase 1/2 trial of EBT-101 in hiv and in vivo efficacy data in herpes virus and hepatitis B. Press release, 13 May 2024.